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光学显微镜是为了使肉眼看不清楚的标本影像,人们设想经过一种装置 ,使肉眼能够观察到该标本组织形态和其间的结构。这种设想的装置就被后人创造问世了。当前广泛应用在各种微小物体的观察、测定 、分析、分类、鉴定等 。在波长范围上也不限於可见光波段(4000~7000
)而且(>2000
)到红外(1~2u)以及用眼睛观察 、显微、摄影和一般辐射检测器放大。
显微镜的分类是根据照明方法,有透射型与反射(落射)型二种。透射型显微镜是应用透射照明通过透明物体的打光方法 。反射型显微镜是以物镜上方打光到(落射照明)不透明的物体上。另一种分类方法,系根据观察方法的差异 ,分为明视野显微镜、暗视野显微镜 、相位差显微镜、偏光显微镜、干涉相位差显微镜 、萤光显微镜等。每种显微镜一般又各有透射型和反射型二种 。在这些显微镜中,特别是明视野显微镜是构成所有显微镜中组成最基本的基础。通过这种显微镜观察的物体,穿过透过(吸收)率、反射率 ,因场所不同而各不相同,这种物体被称为随照明光强度(振幅)变化振幅物体,无色透明物体只有在照明相位改变时,才能被肉眼观察到 ,由於明视野显微镜不能改变相位,所以对透明不染色标本不能被观察到。
显微镜的光学显微镜
显微摄影,教学和科技影片常采用的摄影方法。即连接显微镜与摄影装置 ,使通过显微镜观察到的物象记录于感光胶片上,从而获得镜头画面的摄影方法 。它是揭示肉眼看不见的微观世界的技术手段。用显微摄影能记录如细菌繁殖、成长等活动过程,从而使人们能真切地认识各种微观现象。
为求得高分辨率的显微影像 ,须选用复消色差物镜与摄影专用目镜或平周目镜配合 。显微摄影的照明方法,分为透射照明、落射照明(垂直照明)和明视野与暗视野照明。同时还应注意各种滤色片的选用。
显微摄影是把显微镜的物镜和目镜所组成的光学成像系统作为照相机的镜头去拍摄一般用肉眼无法看清的标本 。这种对微小物体“放大录像”,可直接为教学 ,科研提供方便。根据显微镜的结构可知:当被观察的标本放在物镜前焦点稍外一点的位置时,将在目镜前焦点内侧且靠近焦点的位置处形成一个放大倒立的实像,这时再通过目镜(这时的作用象普通放大镜)就可看到一个放大倒立的虚像。
如果调节物镜成像的位置(可使标本适当远离物镜或升高目镜 ,即增大目镜与物镜间的距离,使中间成像介于目镜的一倍焦距与两倍焦距之间),使物镜所成的像位于目镜前焦点的外侧,此像再经过目镜放大 ,即可在目镜的另一侧得到一个经二次放大的正立实像,当光源足够强时,此像可使底片或相纸感光 ,或者使数码相机 、摄像机的CCD光电元件感光成像,这就是显微摄影的原理 。
它是在1590年由荷兰的詹森父子所首创。光学显微镜可把物体放大1600倍,分辨的最小极限达0.1微米。光学显微镜的种类很多 ,除一般的外,主要有暗视野显微镜一种具有暗视野聚光镜,从而使照明的光束不从中央部分射入 ,而从四周射向标本的显微镜.荧光显微镜以紫外线为光源,使被照射的物体发出荧光的显微镜 。结构为:目镜,镜筒 ,转换器,物镜,载物台,通光孔 ,遮光器,压片夹,反光镜 ,镜座,粗准焦螺旋,细准焦螺旋 ,镜臂,镜柱。 相位差显微镜的结构: 相位差显微镜,是应用相位差法的显微镜。因此 ,比通常的显微镜要增加下列附件:
(1) 装有相位板(相位环形板)的物镜,相位差物镜。
(2) 附有相位环(环形缝板)的聚光镜,相位差聚光镜 。
(3) 单色滤光镜-(绿)。
各种元件的性能说明
(1) 相位板使直接光的相位移动 90° ,并且吸收减弱光的强度,在物镜后焦平面的适当位置装置相位板,相位板必须确保亮度,为使衍射光的影响少一些 ,相位板做成环形状。
(2) 相位环(环状光圈)是根据每种物镜的倍率,而有大小不同,可用转盘器更换 。
(3) 单色滤光镜系用中心波长546nm(毫微米)的绿色滤光镜。通常是用单色滤光镜入观察。相位板用特定的波长 ,移动90°看直接光的相位 。当需要特定波长时,必须选择适当的滤光镜,滤光镜插入后对比度就提高。此外 ,相位环形缝的中心,必须调整到正确方位后方能操作,对中望远镜就是起这个作用部件。 将传统的显微镜与摄象系统 ,显示器或者电脑相结合,达到对被测物体的放大观察的目的 。最早的雏形应该是相机型显微镜,将显微镜下得到的图像通过小孔成象的原理 ,投影到感光照片上,从而得到。或者直接将照相机与显微镜对接,拍摄。随着CCD摄像机的兴起,显微镜可以通过其将实时图像转移到电视机或者监视器上 ,直接观察,同时也可以通过相机拍摄 。80年代中期,随着数码产业以及电脑业的发展 ,显微镜的功能也通过它们得到提升,使其向着更简便更容易操作的方面发展。到了90年代末,半导体行业的发展 ,晶圆要求显微镜可以带来更加配合的功能,硬件与软件的结合,智能化 ,人性化,使显微镜在工业上有了更大的发展。
随着CMOS镜头技术在显微镜领域应用的成熟,及数码输出技术的发展 ,其市面上的视频显微镜 ,不仅有通过PC机来显示显微的视频显微镜 ,还有显微镜本身有独立屏幕的视频显微镜,例如3R的MSV35;有可通过无线传输方式可移动的无线视频显微镜 ,其都脱离了PC机的显示,例如3R的WM401TV、WM601TV,且其CMOS镜头的显微镜其大小要比传统的显微镜更加精巧 ,可应用于现场进行显微观测。 在萤光显微镜上,必须在标本的照明光中,选择出特定波长的激发光 ,以产生荧光,然后必须在激发光和荧光混合的光线中,单把荧光分离出来以供观察 。因此 ,在选择特定波长中,滤光镜系统,成为极其重要的角色。
荧光显微镜原理:
(A) 光源:光源辐射出各种波长的光(以紫外至红外)。
(B) 激励滤光源:透过能使标本产生萤光的特定波长的光 ,同时阻挡对激发萤光无用的光 。
(C) 荧光标本:一般用荧光色素染色。
(D) 阻挡滤光镜:阻挡掉没有被标本吸收的激发光有选择地透射荧光,在荧光中也有部分波长被选择透过。以紫外线为光源,使被照射的物体发出荧光的显微镜 。电子显微镜是在1931年在德国柏林由克诺尔和哈罗斯卡首先装配完成的。这种显微镜用高速电子束代替光束。由于电子流的波长比光波短得多,所以电子显微镜的放大倍数可达80万倍 ,分辨的最小极限达0.2纳米 。1963年开始使用的扫描电子显微镜更可使人看到物体表面的微小结构。
显微镜被用来放大微小物体的图像。一般应用于对生物、医药 、微观粒子等观测 。
(1)利用微微动载物台之移动,配全目镜之十字座标线,作长度量测。
(2)利用旋转载物台与目镜下端之游标微分角度盘 ,配全合目镜之址字座标线,作角度量测,令待测角一端对准十字线与之重合 ,然后再让另一端也重合。
(3)利用标准检测螺纹的节距、节径、外径 、牙角及牙形等尺寸或外形。
(4)检验金相表面的晶粒状况 。
(5)检验工件加工表面的情况。
(6)检测微小工件的尺寸或轮廓是否与标准片相符。 偏光显微镜是用于研究所谓透明与不透明各向异性材料的一种显微镜 。凡具有双折射的物质,在偏光显微镜下就能分辨的清楚,当然这些物质也可用染色法来进行观察 ,但有些则不可能,而必须利用偏光显微镜。(1)偏光显微镜的特点
将普通光改变为偏振光进行镜检的方法,以鉴别某一物质是单折射(各向同行)或双折射性(各向异性)。双折射性是晶体的基本特性 。因此 ,偏光显微镜被广泛地应用在矿物、化学等领域,在生物学和植物学也有应用。
(2)偏光显微镜的基本原理
偏光显微镜的原理比较复杂,在此不作过多介绍,偏光显微镜必须具备以下附件:起偏镜,检偏镜 ,补偿器或相位片,专用无应力物镜,旋转载物台。
解剖显微镜 ,又被称为实体显微镜、体视显微镜或立体显微镜,是为了不同的工作需求所设计的显微镜 。利用解剖显微镜观察时,进入两眼的光各来自一个独立的路径 ,这两个路径只夹一个小小的角度,因此在观察时,样品可以呈现立体的样貌。解剖显微镜的光路设计有两种: The Greenough Concept和The Telescope Concept。解剖显微镜常常用在一些固体样本的表面观察 ,或是解剖 、钟表制作和小电路板检查等工作上 。 生物显微镜是用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养 、流质沉淀等的观察和研究,同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。生物显微镜也是食品厂、饮用水厂办QS、HACCP认证的必备检验设备。
用途:用于生物学 、细菌学、组织学、药物化学等研究工作以及临床度验之用。具有粗微动同轴的调焦机构,滚珠内定位转换器 ,亮度可调的照明装置,并带有摄影 、摄像接口 。
透反射式偏光显微镜
透反射式偏光显微镜,随着光学技术的不断进步,作为光学仪器的偏光显微镜 ,其应用范围也越来越广阔,许多行业,如化工的化学纤维 ,半导体工业以及药品检验等等,也广泛地使用偏光显微镜。XPV-213透射偏光显微镜就是非常适用的产品,可供广大用户作单偏光观察 ,正交偏光观察,锥光观察以及显微摄影,配置有石膏λ、云母λ/4试片、石英楔子和移动尺等附件 ,是一组具有较完备功能和良好品质的新型产品.本仪器的具有可扩展性,可以接计算机和数码相机。对进行保存 、编辑和打印 。
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